"Validación de un método espectrofluorimétrico supramolecular para la determinación de 6-hidroximelatonina en muestras reales.?-

GUADALUPE G. MIÑAMBRES; A. GUILLERMO BRACAMONTE; ALICIA V. VEGLIA

Bahía Blanca-Argentina

Congreso; V Congreso Argentino de Química Analítica; 2009

Asociación Argentina de Química Analítica

En nuestro organismo, determinados compuestos orgánicos cumplen importantes roles biológicos, y tanto éstos como sus metabolitos requieren de métodos sencillos, sensibles y confiables para su determinación en fluidos biológicos. La melatonina (M) es una hormona natural del cerebro cuya principal función en el organismo del ser humano es regular los ritmos circadianos, sueño-vigilia. La M es producida por varios tejidos entre ellos se puede mencionar: glándula pineal, retina, macrófagos y el tracto gastrointestinal. La metabolización produce principalmente 6-hidroximelatonina (6HM) que posteriormente es excretada por orina. Se ha determinado que la disminución de la excreción nocturna de 6HM en orina está relacionada con niveles de secreción de M en plasma por debajo de lo normal. Estos resultados son interpretados como que las cantidades de 6HM excretada son una buena medida de la secreción de M que está relacionada con desórdenes psiquiátricos. En nuestro grupo hemos estudiado la influencia de ciclodextrinas en las propiedades fluorescentes de indoles entre ellos la 6HM. Con este compuesto se encontró interacción supramolecular utilizando como receptor la β-ciclodextrina (CD) y la hidroxipropil-β-ciclodextrina (HPCD). Se observó intensificación de la señal fluorescente y un incremento en la sensibilidad de calibración con ambos receptores de 55% y 219%, respectivamente. El mejor limite de detección (LOD ng/mL) se obtuvo con la HPCD (0,71 ng/mL a pH=7,00 y 25ºC). Se analizó la aplicabilidad del método para la determinación de 6HM en fluidos biológicos (orina humana de adulto sano) por el método de adiciones estándares. Se obtuvieron buenos valores para las recuperaciones (95-109 %) de los fortificados de matrices procesadas por métodos convencionales de literatura. Para corroborar la exactitud del método se estudió el efecto matriz aplicando a los valores de recuperación promedio para siete niveles de fortificación el test t de dos colas al 95% del nivel de confianza. El resultado obtenido comprueba la existencia de un efecto matriz que puede ser normalizado mediante la sensibilidad de calibración sobre matriz.